高效液相色譜儀通常操作使用步驟和使用常見(jiàn)問(wèn)題

高效液相色譜儀(HPLC)是應(yīng)用高效液相色譜原理，主要用于分析高沸點(diǎn)不易揮發(fā)的、受熱不穩(wěn)定的和分子量大的有機(jī)化合物的儀器設(shè)備。它由儲(chǔ)液器、泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測(cè)器、記錄儀等幾部分組成。儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱(固定相) 內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，在兩相中做相對(duì)運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過(guò)反復(fù)多次的吸附- 解吸的分配過(guò)程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過(guò)檢測(cè)器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號(hào)傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來(lái)。HPLC廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)、食品科學(xué)、藥物研究以及環(huán)境研究中。

　　高效液相色譜儀通常操作使用步驟和使用常見(jiàn)問(wèn)題：

　　1.開(kāi)機(jī)按溶劑輸液泵上的power鍵，待自檢完畢后開(kāi)始進(jìn)行操作。

　　2.排氣

　　逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)排氣閥（不可超過(guò)180°）,打開(kāi)排氣閥，按purge鍵排氣泡，在此期間流動(dòng)相連續(xù)流出并且無(wú)氣泡；按purge鍵，泵停止，將排液閥旋鈕順時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)到底，關(guān)閉排液閥

　　3.沖流動(dòng)相

　　按Pump鍵，泵啟動(dòng)，觀察屏幕上壓力顯示，壓力上升平穩(wěn)后，繼續(xù)按上述方法升高流速，使流速上升到實(shí)驗(yàn)需要的流速。

　　4.進(jìn)樣

　　打開(kāi)檢測(cè)器，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)為實(shí)驗(yàn)需要的波長(zhǎng)；打開(kāi)工作站，查看基線(xiàn)，待基線(xiàn)走平后，進(jìn)樣。

　　5.使用后維護(hù)

　　6.水或含水甲醇溶液沖洗

　　6.1 水或含水甲醇溶液沖洗

　　使用結(jié)束后，將流速降到0.1 ml/min，按Pump鍵，泵停止。換下流動(dòng)相，換上已抽濾并超聲過(guò)的純凈水或含水甲醇溶液。按Pump鍵，泵啟動(dòng)，觀察屏幕上壓力顯示，壓力上升平穩(wěn)后，繼續(xù)按上述方法升高流速。如流動(dòng)相含有無(wú)機(jī)鹽，必須保證足夠的沖洗時(shí)間。

　　6.2甲醇溶液沖洗

　　換上已抽濾并超聲過(guò)的甲醇溶液，按3.1的操作進(jìn)行封柱處理。

　　7 關(guān)機(jī)

　　按Pump鍵，關(guān)閉泵；關(guān)閉桌面在線(xiàn)工作站；按Power鍵關(guān)閉LC-10ATvp。

　　8.注意事項(xiàng)

　　8.1 不能使用濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、二氯甲烷、氯仿、二甲基亞砜等作為流動(dòng)相。

　　8.2 流動(dòng)相溶劑選擇H

　　8.3 流動(dòng)相溶劑必須進(jìn)行脫氣。若不脫氣則在溶劑混合時(shí)或壓力、溫度變化時(shí)容易產(chǎn)生氣泡，會(huì)引起泵的誤動(dòng)作和生產(chǎn)檢測(cè)器信號(hào)噪音。

　　8.4 以硅膠作載體的化學(xué)鍵合填充劑的穩(wěn)定性受流動(dòng)相pH值的影響，使用時(shí)應(yīng)詳細(xì)閱讀該柱的說(shuō)明書(shū)，在規(guī)定的pH值范圍內(nèi)使用。使用時(shí)，可在泵與進(jìn)樣器之間連接一硅膠柱，以保護(hù)分析柱。當(dāng)使用高PH或含鹽的流動(dòng)相時(shí)，盡可能縮短使用時(shí)間，用后立即沖洗。

　　8.5 分析結(jié)束后，從色譜流路系統(tǒng)，泵、進(jìn)樣器、色譜柱至檢測(cè)器流通池，均應(yīng)充分沖洗，特別是含鹽的流動(dòng)相，更應(yīng)注意先用水、再用含水甲醇溶液充分沖洗。如發(fā)現(xiàn)嚴(yán)重故障，應(yīng)與廠(chǎng)家聯(lián)系維修。

　　8.6 請(qǐng)?jiān)谑褂们俺浞珠喿x作業(yè)指導(dǎo)書(shū)，不得擅自拆卸儀器的零部件。